HCT-8人回盲腸癌細胞（STR鑒定報告）

貨號：IM-H099 來源：ECACC

規(guī)格：1x10⁶cells/T25或1mL凍存管

形態(tài)：上皮細胞樣，貼壁生長

培養(yǎng)基：90%DMEM+10% FBS+PS

傳代方法：1:2至1:3，每周2-3次

人回盲腸癌細胞HCT8細胞說明書

價格：￥1200

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背景介紹培養(yǎng)操作凍存步驟售后服務(wù)

背景簡介

HCT-8 [HRT-18]細胞與HRT-18細胞是一樣的；角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。

一、細胞基本屬性
細胞名稱	HCT-8人回盲腸癌細胞（STR鑒定報告）
細胞別稱	HCT-8; HCT8
種屬來源	人
年齡性別	男；67歲
組織來源	結(jié)腸；回盲腸結(jié)直腸腺癌
生長特性	貼壁生長
細胞形態(tài)	上皮細胞樣
STR位點	Amelogenin：X；CSF1PO：12；D13S317：8，11；D16S539：12，13；D18S51：11，17；D19S433：14，16；D21S11：29，32.2；D2S1338：17，25；D3S1358：17；D5S818：13；D7S820：10，11.3；D8S1179：15；FGA：22；TH01：7，9.3；TPOX：8，11；vWA：18，19；
STR鑒定位點圖
細胞代數(shù)	10代以內(nèi)
生物安全等級	1
使用權(quán)限	A類
細胞規(guī)格	1x10⁶cells/T25或1mL凍存管
支原體檢測	無
保藏機構(gòu)	ECACC; 90032006；中國典型培養(yǎng)物保藏中心細胞庫
培養(yǎng)基	90%DMEM+10% FBS+PS
培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件	無血清凍存液，液氮儲存
致瘤性	Yes, in nude mice(Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^8 cells).
基因表達情況	carcinoembryonic antigen (CEA) 0.5 ng/10^6 cells/10 days; alkaline phosphatase. The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining.
染色體	81~90
供應(yīng)限制	僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
細胞貨期	現(xiàn)貨，1周左右
運輸方式	復(fù)蘇發(fā)貨（T25瓶免運輸費用）/ 凍存發(fā)貨（需加干冰運輸費用）順豐快遞
特別說明	以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主
二、細胞培養(yǎng)操作
到貨方式	復(fù)蘇細胞/T25瓶運輸
收貨處理	1.收到細胞后，請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況，是否有破損、漏液、渾濁等現(xiàn)象。如果有，請立即和我們聯(lián)系；如果沒有，請您用75%酒精消毒細胞瓶外壁，再將其置于37度培養(yǎng)箱靜置4h。 2.靜置后觀察細胞狀態(tài)，在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)時，最好在低倍鏡（4或5X物鏡）下進行，能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態(tài)請在10X和20X物鏡下，同時給剛收到的細胞拍照，（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為細胞需要售后時提供收到細胞時細胞狀態(tài)的依據(jù)。拍照反饋給我們。
傳代密度	細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)
傳代方法	1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 2.加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細胞，棄去消化液，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。 3.按6-8 mL/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心4 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。 4.將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
到貨方式	凍存細胞/1ml凍存管運輸
收貨處理	1.干冰運輸?shù)募毎截洠垯z查干冰是否完全揮發(fā)，細胞是否解凍，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。 2.為保證細胞的高存活率，收到產(chǎn)品后，請立即解凍復(fù)蘇細胞，如若不能復(fù)蘇請立即轉(zhuǎn)入液氮凍存。
培養(yǎng)皿/瓶	一管細胞建議接種到6cm培養(yǎng)皿或者T25瓶
復(fù)蘇操作	1.將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。 2.在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。 3.然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤? cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。 4.第二天換液并檢查細胞密度。
注意事項	1.運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 2.因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。 3. 凍存細胞發(fā)貨2管，客戶先復(fù)蘇一支，若復(fù)蘇失敗及時聯(lián)系我方并在我方指導(dǎo)下復(fù)蘇第二支。 4. 申請售后時請?zhí)峁┘毎肇洉r及反饋售后當(dāng)天細胞清晰照片及培養(yǎng)信息，建議客戶在細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。 5.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。 6. 細胞在不同實驗室培養(yǎng)由于所使用培養(yǎng)基及血清品牌、個人操作習(xí)慣、培養(yǎng)瓶品牌等諸多培養(yǎng)條件不盡相同，導(dǎo)致細胞培養(yǎng)形態(tài)、生長速度、貼壁情況均可能有所差異，對于此類細胞適應(yīng)環(huán)境生長的行為，不予過度解釋或免費售后。
三、細胞凍存操作
凍存液配方	無血清凍存液，液氮儲存
凍存密度	如果是有要求每管要凍多少細胞，那就用1ml完培重懸后，取部分按平時方法計數(shù)，剩下的細胞按計數(shù)需要的細胞量凍存即可。如果沒要求，那就按平時，一個皿凍一管。
凍存方法	待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例 1.收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，加1 mL血清重懸細胞，進行細胞計數(shù)。 2.根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5x10⁶~1x10⁷/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。 3.將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
注意事項	凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細胞凍存活性，若有異常，及時調(diào)整實驗方案

參考文獻

ATF3 inhibits the growth and stem cells-like features of SW620 colorectal cancer cells in vitro. Journal of Men's Health. 2021. 17(4);287-294.

作者：Chuanqian Huang, Changdan Chen, Fangjing Zheng, Xiaoxiao Ni, Jianfang Lin, Wenjuan Wu, Xiaolan Lai.

細胞：The human colon cell line NCM460 and the CRC cell lines SW620, SW480, HT29, HCT8, and HCT116.

2022年影響因子/JCR分區(qū)：0.789/Q4

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作者：Lin L, He Y, Ni Z, Zhang M, Liu J, Mao Q, Huang B, Lin J.

細胞：HCT-8, HCT-116, SW480, SW620, and NCM460 w

2022年影響因子/JCR分區(qū)：2.123/Q3

MicroRNA-323a-3p Negatively Regulates NEK6 in Colon Adenocarcinoma Cells. J Oncol. 2022 Jan 19;2022:7007718. doi: 10.1155/2022/7007718. PMID: 35096064; PMCID: PMC8791743.

作者：Hong Z, Chen Z, Pan J, Shi Z, Wang C, Qiu C.

細胞：SW480, SW620, HCT-8, and HCT-116 colorectal cancer cells and NCM460 normal human colon mucosal epithelial cell lines

2022年影響因子/JCR分區(qū)：4.501/Q2

Prognostic role of oxytocin receptor in colon adenocarcinoma. Open Med (Wars). 2021 Nov 22;16(1):1762-1776. doi: 10.1515/med-2021-0387. PMID: 34877409; PMCID: PMC8610102.

作者：Sun J, Xu Z, Mao Y, Zhang T, Qin Y, Hua D.

細胞：The human COAD cell lines HCT-8 and RKO, SW620 and SW480, Human normal colon epithelial cell line NCM-460

2022年影響因子/JCR分區(qū)：2.123/Q3

科研細胞購買常見問題

問：為什么官網(wǎng)的培養(yǎng)條件和我看的文獻里細胞培養(yǎng)條件不一樣呢？

答：部分細胞是會出現(xiàn)多種培養(yǎng)條件，我們公司優(yōu)先選擇引種來源的培養(yǎng)條件以及建系者所用培養(yǎng)條件，出現(xiàn)差異的原因是不同實驗室在保藏過程中更改了細胞的培養(yǎng)條件，為了避免細胞突然更換培養(yǎng)條件后不適應(yīng)，建議老師使用廠家推薦的培養(yǎng)條件培養(yǎng)。

問：凍存細胞運輸與常溫細胞運輸相比有什么區(qū)別？

答：細胞株發(fā)貨有常溫或者凍存兩種形式，常溫細胞貨期一般一周左右，復(fù)蘇活細胞一個T25瓶發(fā)貨；凍存細胞有庫存的話，一般當(dāng)天或者隔天可以發(fā)貨，細胞系凍存細胞擔(dān)心客戶復(fù)蘇不成功所以贈送了一管，實際發(fā)貨2管；原代凍存細胞發(fā)貨1管，凍存細胞發(fā)貨是10公斤干冰及順豐運輸，所以凍存細胞需額外支付干冰及運輸費200元。

問：培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)瓶可以重復(fù)利用嗎？

答：一般不建議重復(fù)利用，特別是貼壁不牢固細胞，重復(fù)利用會導(dǎo)致吸附性變差，漂浮增多;一個T25瓶建議使用最多不超過3次，其次需要注意無菌操作，避免污染。

問：運輸細胞用的培養(yǎng)基可以回收使用嗎?

答：不能回收使用的，運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)營養(yǎng)在路上已經(jīng)消耗得差不多，所以收到細胞之后，培養(yǎng)箱靜置4-6h之后，請及時按照說明書細胞培養(yǎng)條件更換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)。

問：凍存的細胞出現(xiàn)顏色不一致，有的紅有的粉，對復(fù)蘇會有影響嗎？

答：這種情況容易在不同凍存批次間出現(xiàn)，與凍存細胞的密度、凍存液配方、溫度導(dǎo)致pH變化等有關(guān)，偶爾有遇到這種情況，不是絕對性對細胞狀態(tài)有影響，可以復(fù)蘇看下。

問：不同引種單位的同一株細胞，RRID都是一樣的嗎？

答：是的，同一個細胞系只有一個RRID。