本視頻為廈門逸漠生物科技有限公司出品關(guān)于復蘇細胞到貨如何處理，我們對每一步操作都做了演示，以便實驗者更好地理解常溫運輸細胞轉(zhuǎn)移實驗過程。

細胞收貨處理(T25瓶)

實驗準備

提前開啟紫外照射30min消毒滅菌，工作臺開燈通風10min，用75%酒精擦拭臺面

所需試劑物品

完全培養(yǎng)基、胰酶、PBS

到貨處理

1.在細胞間拆封包裹，閱讀細胞說明書和檢測報告

2.取出T25瓶，檢查是否在運輸過程中破損，在顯微鏡下鏡檢并拍照存檔

3.放入培養(yǎng)箱穩(wěn)定細胞狀態(tài)，約2-4小時

4.2-4小時后拿出T25細胞瓶，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)，細胞狀態(tài)穩(wěn)定密度85%以上，即進行細胞轉(zhuǎn)移步驟

細胞遷移步驟

第一步：吸出運輸用培養(yǎng)基，加入5m」1xPBS清洗1遍，去掉PBS，加入2m1胰酶消化，并放入培養(yǎng)箱孵育1-2min

第二步：在顯微鏡下觀察細胞是否脫落，加入3mI完全培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹打細胞，使其脫離瓶壁

第三步：細胞懸液轉(zhuǎn)移到15ml離心管中，1000rpm離心5min

第四步：拿出一個新的10cm培養(yǎng)皿，加入8-10ml完 全培養(yǎng)基，在皿上標記細胞名稱，培養(yǎng)基名稱，日期

第五步：離心結(jié)束后，用75%的酒精噴管身后，放回工作臺中，去上清，加入1m]完全培養(yǎng)基，重懸后加到10cm培養(yǎng)皿中，放入37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)

注意事項

1.收到細胞后，首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系

2.靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照(當天以及第 2,3 天請拍照)，記錄細胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)

3.由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決

4.仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致