結(jié)直腸癌(Colorectal cancer，CRC)是一種起源于結(jié)腸或直腸內(nèi)的惡性腫瘤。根據(jù)國家癌癥中心最新統(tǒng)計數(shù)據(jù)，我國結(jié)直腸癌發(fā)病率居惡性腫瘤第二位，死亡率居第四位，結(jié)直腸癌的治療方法通常包括手術(shù)切除、放療、化療和靶向治療等。結(jié)直腸癌(Colorectal cancer，CRC)是一種起源于結(jié)腸或直腸內(nèi)的惡性腫瘤。根據(jù)國家癌癥中心最新統(tǒng)計數(shù)據(jù)，我國結(jié)直腸癌發(fā)病率居惡性腫瘤第二位，死亡率居第四位，結(jié)直腸癌的治療方法通常包括手術(shù)切除、放療、化療和靶向治療等。手術(shù)切除是最常見的治療方法。放療和化療常常與手術(shù)聯(lián)合應(yīng)用，以清除殘余癌細(xì)胞或控制腫瘤的擴(kuò)散。靶向治療是一種針對特定癌癥細(xì)胞的治療方法，通過抑制細(xì)胞生長或破壞其發(fā)展的信號傳遞途徑來達(dá)到治療的效果。常見的化療藥物有5-氟尿嘧啶、奧沙利鉑、卡培他濱以及靶向治療藥物：如抗EGFR抗體(如西妥昔單抗，Cetuximab)和抗VEGF抗體(如貝伐珠單抗，Bevacizumab)等。

結(jié)直腸癌常用的動物模型

腫瘤模型對研究腫瘤生長的生物學(xué)過程和抗腫瘤治療藥物的研發(fā)非常重要。國內(nèi)外建立結(jié)直腸癌動物模型的報道有很多，大體可以分為以下三種：

化學(xué)誘導(dǎo)模型 

誘發(fā)型結(jié)直腸癌模型多采用化學(xué)誘發(fā)途徑，常用的誘導(dǎo)劑有二甲基肼(dimethylhydrazine,DMH)、氧化偶氮甲烷(azoxymethane,AOM)及致炎劑葡聚糖硫酸鈉(dextran sulfate sodiuln, DSS)。DMH本身不致癌，但在肝細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)被氧化成甲基氧化偶氮甲醇，隨膽汁進(jìn)入腸腔，導(dǎo)致結(jié)直腸癌上皮癌變。AOM是DMH在肝臟的代謝產(chǎn)物，它通過DNA烷化，促進(jìn)堿基的錯誤配對，導(dǎo)致腸癌的發(fā)生。

轉(zhuǎn)基因小鼠模型

在結(jié)直腸癌研究中，轉(zhuǎn)基因小鼠模型可以模擬結(jié)直腸癌的發(fā)展和機(jī)制。以下是一些常見的轉(zhuǎn)基因腸癌小鼠模型

1.APC Min/+ 小鼠模型是最常見的腸癌模型之一。其利用APC基因突變模擬人類腸癌中的APC基因突變。這個突變會影響Wnt信號通路的調(diào)控，導(dǎo)致細(xì)胞增殖異常，促進(jìn)腫瘤的發(fā)展。APC Min/+ 小鼠會產(chǎn)生多發(fā)性腸道腺瘤，最終導(dǎo)致結(jié)腸腺癌的產(chǎn)生。這是一種遺傳模型，不能模擬所有腸癌的變異情況，但是研究腸道腫瘤發(fā)展和藥物治療評價非常有用的小鼠模型。

2.Villin-CreERT2;APC flox/flox 模型是另一種常用于研究腸癌的轉(zhuǎn)基因小鼠模型，它結(jié)合了Villin基因驅(qū)動的Cre酶表達(dá)和APC基因的floxed(flanked by loxP sites)序列，通過給予小鼠誘導(dǎo)劑(如tamoxifen)激活Cre酶，可以在特定時間點(diǎn)誘導(dǎo)APC基因的缺失，引發(fā)腸癌。該模型可以模擬腸癌的發(fā)展，并研究在特定時間點(diǎn)缺失APC基因?qū)δc道腫瘤的影響。

3.LSL-K-ras G12D模型是一種用于研究腫瘤發(fā)展和癌基因K-ras的小鼠模型。K-ras G12D 的過度激活已與多種癌癥相關(guān)，包括肺癌和結(jié)直腸癌。這個模型為了激活K-ras G12D 突變，使用Cre酶來剪切l(wèi)oxP位點(diǎn)，從而激活K-ras基因的表達(dá)，促進(jìn)癌癥的產(chǎn)生。該模型可用于研究K-ras G12D 在腫瘤發(fā)展中的作用。

移植瘤模型

結(jié)直腸癌移植瘤模型主要分為三種：同源腫瘤移植瘤模型(Syngeneic)、人腫瘤細(xì)胞株異種移植模型(CDX)、患者來源的腫瘤異種移植模型(PDX)。

同源腫瘤移植瘤模型(Syngeneic)

常見的同源移植結(jié)直腸癌模型是使用結(jié)直腸癌細(xì)胞系在同種動物體內(nèi)進(jìn)行移植的模型。以下是一些常見的同源結(jié)直腸癌模型：

1.CT26 細(xì)胞系模型是一種常用于癌癥研究的小鼠同源移植結(jié)直腸癌模型。CT26細(xì)胞系最早由Balb/c小鼠的結(jié)腸腺癌組織中分離出來，將其接種于Balb/c小鼠構(gòu)建而成的移植瘤模型被廣泛用于腫瘤生物學(xué)、藥物治療以及免疫治療研究等領(lǐng)域。

2.MC38 細(xì)胞系模型是一種用MC38細(xì)胞系在小鼠體內(nèi)進(jìn)行同源小鼠移植結(jié)腸癌模型。MC38細(xì)胞最早是由C57BL/6小鼠的結(jié)腸腺癌組織中分離獲得的，將其接種于C57BL/6小鼠構(gòu)建而成的移植瘤模型常用于研究腫瘤生物學(xué)和腫瘤的免疫治療等。

3.CMT93 細(xì)胞系模型是用 CMT93 細(xì)胞系的同源小鼠移植結(jié)腸癌模型。CMT93 細(xì)胞系是從Balb/c 小鼠的結(jié)腸腺癌組織中分離獲得的細(xì)胞系，將其接種于Balb/c小鼠構(gòu)建而成的移植瘤模型被廣泛用于實(shí)驗(yàn)室研究，模擬小鼠結(jié)腸腺癌的發(fā)展等。

CDX模型(Cell Derived Xenograft)

CDX模型是指將人源腫瘤細(xì)胞株接種于免疫缺陷小鼠構(gòu)建的腫瘤移植模型。接種部位主要是皮下接種和原位接種。皮下接種荷瘤小鼠模型耗時短、費(fèi)用低、操作簡單，但很少出現(xiàn)轉(zhuǎn)移。原位接種荷瘤小鼠模型腫瘤生長微環(huán)境與現(xiàn)實(shí)更相似，但操作更復(fù)雜且易出現(xiàn)轉(zhuǎn)移。常見的結(jié)直腸癌細(xì)胞株CDX模型有HCT-116、SW620、SW480、Caco-2、HT-29、 COLO 205、 LS 180等。

PDX模型(Patient Derived Xenografts)

PDX模型是將患者來源的癌癥組織接種于免疫缺陷小鼠體內(nèi)構(gòu)成的模型。該模型保留了原發(fā)腫瘤的細(xì)胞和組織病理學(xué)結(jié)構(gòu)，基因組和基因表達(dá)譜也很大程度被保留，對臨床療效的可預(yù)測性達(dá)到80%以上，是目前公認(rèn)的準(zhǔn)確性最高的腫瘤學(xué)研究模型。但由于PDX模型構(gòu)建成本高，患者的癌組織或細(xì)胞不易獲得，成瘤時間長，成瘤率低等原因，因此PDX模型特別珍貴。南昌樂悠生物科技有限公司已成功構(gòu)建了47例腸癌PDX，為腫瘤基礎(chǔ)研究及抗癌藥物臨床前藥效評價提供了有效工具。

結(jié)直腸癌(colorectal cancer，CRC)是胃腸道中常見的消化道惡性腫瘤，其發(fā)病率和病死率在消化系統(tǒng)惡性腫瘤中僅次于胃癌、食管癌和原發(fā)性肝癌，發(fā)病原因尚未明確。因此，結(jié)直腸癌的發(fā)病機(jī)制、進(jìn)展及藥物治療研究成為了醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)，而作為研究的基礎(chǔ)材料，結(jié)直腸癌細(xì)胞系的選擇十分重要，我們常用的結(jié)直腸癌細(xì)胞系有哪些呢

結(jié)直腸癌常用細(xì)胞株(Cell lines )

HCT-116細(xì)胞株

來源于一名52歲男性患者結(jié)腸腺癌組織;屬于中等分化的細(xì)胞株;細(xì)胞通常呈現(xiàn)多角形的形態(tài);基因譜表達(dá)CEA+，keratin+、TGF β 1+和TGF β 2 +; ras原癌突變基因。

SW620細(xì)胞株

來源于一名51歲男性患者Dukes’C 型結(jié)腸腺癌大腸組織;與SW480是同一病人一年后復(fù)發(fā)的轉(zhuǎn)移灶，已轉(zhuǎn)移至淋巴結(jié);基因譜表達(dá)CEA+、TGF β+、keratin+、myc+、myb+、ras+、fos+、sis+、p53+、abl-、ros-、src-、CSAp-和colon antigen 3-。

SW480細(xì)胞株

來源于一名50歲白人男性患者的Duckes’C 型原位結(jié)腸腺癌組織;屬于相對較低分化的細(xì)胞株;細(xì)胞呈現(xiàn)典型的上皮細(xì)胞形態(tài);基因譜表達(dá)CEA+、TGF β+、myc+、myb+、ras+、fos+、sis+、p53+、abl-、ros-、src- 及EGF+。

Caco-2細(xì)胞株

來源于一名72歲的白人男性II期中等分化原位結(jié)腸腺癌患者的腫瘤組織;基因譜表達(dá)keratin+、Retinic acid binding protein 1+、retinol binding protein 2+。

HT-29細(xì)胞

1964年由Fogh J用移植培養(yǎng)方法和含15%FBS的F12培養(yǎng)液從原發(fā)性腫瘤分離的。該細(xì)胞系在裸鼠中成瘤，也能在類固醇處理的地鼠中成瘤，可合成IgA、CEA、TGFβ結(jié)合蛋白和黏液素，表達(dá)尿激酶受體，但沒有檢測到血漿酶原活性，不表達(dá)CD4，但細(xì)胞表面表達(dá)半乳糖神經(jīng)酰胺(HIV的可能替代受體)。該細(xì)胞系癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis、fos陽性;p53基因過表達(dá)，并且在273位密碼子存在G→A突變。

LS174T細(xì)胞株

是LS 180結(jié)腸腺癌細(xì)胞株用胰蛋白酶傳代的變異種，比親本更易傳代，能生成大量的癌胚抗原(CEA)。有豐富的微絲和細(xì)胞質(zhì)黏液素液泡;抗原顯示colon cancer antigen 3+、p53-、keratin+;癌基因表達(dá)c-myc+、N-myc+、H-ras+、N-ras+、Myb+和fos+;可產(chǎn)生IL-10、IL-6和黏蛋白。

COLO 205：1957年由T.U.Sample等從患有結(jié)腸癌的70歲男性白人的腹水中分離的。該病人在取腹水樣品前已用5-氟尿嘧啶治療4~6周。角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性;產(chǎn)生CEA、IL10。

LS180細(xì)胞株

來源于一名58歲白人女性患者Duckes’B 型結(jié)腸腺癌組織;基因譜表達(dá)CEA+、IL10+、IL6+、mucin+;colon antigen 3-。

SW1116細(xì)胞株

來源于人三期結(jié)腸腺癌轉(zhuǎn)，上皮細(xì)胞，CSAp陰性，結(jié)腸抗原3陰性，角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性，癌基因c-myc，K-ras，H-ras，Myb，sis和fos的表達(dá)呈陽性，未檢測到癌基因N-myc和N-ras的表達(dá)，表達(dá)腫瘤特異的核基質(zhì)蛋白CC-4、CC-5和CC-6。

LOVO細(xì)胞株

LoVo建自1971年，從診斷為結(jié)腸腺癌的56歲男性白人的一個轉(zhuǎn)移到左鎖骨上區(qū)的腫瘤結(jié)節(jié)建系。癌基因c-myc，K-ras，H-ras，N-ras，Myb，sis和fos的表達(dá)呈陽性，未檢測到N-myc的表達(dá)。該細(xì)胞在裸鼠中能成瘤，表達(dá)腫瘤特異的核基質(zhì)蛋白蛋白CC-3和CC-4。

HCT-15細(xì)胞系

來源于人結(jié)直腸腺癌組織，上皮細(xì)胞，細(xì)胞呈CSAp陰性，角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性，表達(dá)癌胚抗原。

LS 180細(xì)胞

來源于人結(jié)腸組織，上皮細(xì)胞，表達(dá)抗體：結(jié)腸癌抗原3，人類表達(dá)HLAA2，B13，B50，表達(dá)基因：癌胚抗原(CEA)，白細(xì)胞介素10，白細(xì)胞介素6，粘蛋白。

NCI-H716細(xì)胞

1984年建系，源自一位33歲患有大腸腺癌男性經(jīng)5-fu治療后的腹水?？稍诼闶笾谐闪觥＜?xì)胞表達(dá)多巴脫羧酶，細(xì)胞質(zhì)中有核心致密的內(nèi)分泌型顆粒。細(xì)胞不表達(dá)TAG-72，CA19-9和CEA。

COLO 320細(xì)胞株

來源于結(jié)腸組織，結(jié)腸腺癌細(xì)胞，該細(xì)胞能合成復(fù)合胺，腎上腺素。

COLO 320DM細(xì)胞株

來源于Dukes氏C型結(jié)直腸腺癌組織，結(jié)直腸腺癌細(xì)胞，CEA、CSAp和結(jié)腸抗原3呈陰性，該細(xì)胞可產(chǎn)生5-羥色胺、去甲腎上腺素、腎上腺素、ACTH和甲狀旁腺素。角蛋白、波形蛋白弱陽性。

CT26.WT細(xì)胞株

CT26 是以N-nitroso-N-methylurethane-(NNMU)誘導(dǎo)形成的未分化結(jié)腸癌細(xì)胞株，它克隆形成的細(xì)胞株命名為CT26.WT。用包含編碼典型腫瘤相關(guān)抗原(TAA) beta-半乳糖苷酶(beta-gal)的lacZ基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體LXSN穩(wěn)定轉(zhuǎn)染CT26.WT，得到致死的亞克隆CT26.CL25。即使CT26.CL25表達(dá)了典型的TAA beta-半乳糖苷酶，在正常小鼠中CT26.CL25 和 CT26.WT的生長率與致死率也保持基本一致。與CT26.CL25 一起可用作測試免疫治療程序的模型，并用于研究宿主免疫反應(yīng)。

DLD-1細(xì)胞株

1977-1979年間D.L. Dexter和同事分離的兩株結(jié)直腸腺癌細(xì)胞株中的一株。細(xì)胞的CSAp陰性(CSAp-)。DLD-1細(xì)胞的p53 抗原表達(dá)呈陽性(p53抗原產(chǎn)生了一個C→T點(diǎn)突變導(dǎo)致241位的Ser→Phe)。角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。癌基因c-myc, K-ras, H-ras, N-ras, myb, sis 和fos的表達(dá)呈陽性。癌基因N-myc的表達(dá)未做檢測。表達(dá)腫瘤特異性核基質(zhì)蛋白CC-2,CC-3,CC-4,CC-5和CC-6。

RKO細(xì)胞系

是一個低分化的結(jié)腸癌細(xì)胞系。RKO細(xì)胞含有野生型P53，但缺乏人甲狀腺受體核受體(h-TR beta 1)。RKO細(xì)胞的P53蛋白的水平高于RKO-E6細(xì)胞。RKO細(xì)胞系是RKO-E6和RKO-AS45-1的親本細(xì)胞系。該細(xì)胞系在裸鼠中成瘤，且在軟瓊脂中形成集落。

RKO-E6細(xì)胞株

是用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染pCMV-E6的結(jié)腸癌RKO細(xì)胞系。該細(xì)胞含有穩(wěn)定整合受控於巨細(xì)胞病毒啟動子的人乳頭狀病毒(HPV)E6癌基因。RKO-E6細(xì)胞系和它的母系RKO一起可用于研究p53缺失引起的細(xì)胞參數(shù)改變p53介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄和凋亡等。

RKO-AS45-1細(xì)胞

人的cDNA中編碼GADD45的開放閱讀框克隆到表達(dá)載體pCMV.3中，轉(zhuǎn)染結(jié)腸癌細(xì)胞RKO，建立了RKO-AS45-1細(xì)胞株。該細(xì)胞含有穩(wěn)定整合巨細(xì)胞病毒(CMV)啟動子的表達(dá)載體。RKO-AS45-1細(xì)胞系和它的母系RKO一起可用于Gadd45對DNA修復(fù)、凋亡和藥物敏感性研究。

T84細(xì)胞

來源于一位72歲的男性結(jié)直腸癌患者的肺部轉(zhuǎn)移灶;皮下接種至BALB/c裸鼠并連續(xù)傳代23次后建立該細(xì)胞系。在裸鼠身上傳代的過程中，該腫瘤仍保持原始的結(jié)直腸癌的組織學(xué)特性。T84細(xì)胞系生長至飽和狀態(tài)時形成單層細(xì)胞，相鄰細(xì)胞間有緊密連接和細(xì)胞橋粒;該細(xì)胞有多種肽類激素、神經(jīng)遞質(zhì)和維持電解質(zhì)的定向運(yùn)輸?shù)氖荏w，角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。

常見結(jié)直腸癌細(xì)胞株有哪些和結(jié)直腸癌常用的動物模型介紹，各位科研老師可以根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需求選擇結(jié)直腸癌細(xì)胞株。