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MDA-MB-231/Docetaxel人乳腺癌多西紫杉醇耐藥株

貨號:IMD-029

規(guī)格:1x106cells/T25或1mL凍存管

形態(tài):上皮細胞樣,貼壁生長

培養(yǎng)基:專用培養(yǎng)基

培養(yǎng)環(huán)境:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

傳代比例:1:2至1:3,每周 3次

價格:¥9600

配套相關培養(yǎng)產品

  一、細胞基本屬性
細胞名稱MDA-MB-231/Docetaxel人乳腺癌多西紫杉醇耐藥株
細胞別稱MDA-MB-231/Docetaxel; 人乳腺癌多西紫杉醇耐藥株
種屬來源
組織來源乳房
生長特性貼壁生長
細胞形態(tài)上皮細胞樣
細胞代數(shù)      10代以內
細胞規(guī)格1x106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測
培養(yǎng)基專用培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件無血清凍存液,液氮儲存
發(fā)貨方式復蘇發(fā)貨(免運輸費用)/  凍存發(fā)貨(需加干冰運輸費用) 順豐快遞
供應限制僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用
特別說明以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產品說明書為主
  二、細胞培養(yǎng)操作
收貨方式T25瓶凍存管
初步平衡用75%酒精擦拭細胞瓶表面,放37度培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4h,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)無須平衡,直接放入-80冰箱(不超過一周)或者液氮罐保存,建議盡早復蘇
傳代密度細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)第二天換液并檢查細胞密度
傳代比例首次傳代建議1:2傳代
1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
一管細胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶
傳代方法

a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。          
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml完全培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。          
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
注意事項

1.運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。

2.因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。

1.收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完,檢查凍存管是否融化,若已融化需直接離心細胞接種觀察,若未融化可以將細胞按正常步驟保存;
2.為保證細胞的高存活率,收到產品后,請立即解凍復蘇細胞。
到貨須知

1.收到細胞后,首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,干冰運輸?shù)募毎麢z查干冰是否完全揮發(fā),細胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2.靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照(當天以及第 2,3 天請拍照),記錄細胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。

3.由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
4.仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由客戶自行承擔。

備注:客戶在細胞培養(yǎng)過程中,有任何技術問題可以撥打技術服務電話:400-080-3389 按 2,我們隨時給予解答。
  三、細胞凍存操作
凍存液配方無血清凍存液,液氮儲存
細胞密度待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例
凍存方法a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,加 1 mL血清重懸細胞,進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5x106~1x107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
注意事項凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調整實驗方案
  四、售后服務
重發(fā)標準

1.細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,重發(fā);

2.收到細胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā);

3.收到細胞3天內,發(fā)現(xiàn)污染問題,經(jīng)核實后,重發(fā);

4.常溫發(fā)貨的細胞靜置 2 小時后,干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇 2 天后,絕大多數(shù)細胞未存活,經(jīng)核實后,重發(fā);

5.常溫發(fā)貨的細胞靜置 22 小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇 2 天后,出現(xiàn)污染,經(jīng)核實后,重發(fā);

6.細胞活性問題,請在收到產品 3 天內給我們提出真實的實驗結果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,經(jīng)核實后,重發(fā);

7.視具體情況而定。

不予重發(fā)

1.客戶操作造成細胞污染,不重發(fā);

2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);

3.非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);

4.細胞狀態(tài)不好,未提供真實清晰的培養(yǎng)前 3 天的細胞狀態(tài)照片,不重發(fā);

5.細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導致細胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā);

6.收到細胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發(fā);

7.視具體情況而定。

科研細胞購買常見問題

問:為什么官網(wǎng)的培養(yǎng)條件和我看的文獻里細胞培養(yǎng)條件不一樣呢?

答:部分細胞是會出現(xiàn)多種培養(yǎng)條件,我們公司優(yōu)先選擇引種來源的培養(yǎng)條件以及建系者所用培養(yǎng)條件,出現(xiàn)差異的原因是不同實驗室在保藏過程中更改了細胞的培養(yǎng)條件,為了避免細胞突然更換培養(yǎng)條件后不適應,建議老師使用廠家推薦的培養(yǎng)條件培養(yǎng)。

問:凍存細胞運輸與常溫細胞運輸相比有什么區(qū)別?

答:細胞株發(fā)貨有常溫或者凍存兩種形式,常溫細胞貨期一般一周左右,復蘇活細胞一個T25瓶發(fā)貨;凍存細胞有庫存的話,一般當天或者隔天可以發(fā)貨,細胞系凍存細胞擔心客戶復蘇不成功所以贈送了一管,實際發(fā)貨2管;原代凍存細胞發(fā)貨1管,凍存細胞發(fā)貨是10公斤干冰及順豐運輸,所以凍存細胞需額外支付干冰及運輸費200元。

問:培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)瓶可以重復利用嗎?

答:一般不建議重復利用,特別是貼壁不牢固細胞,重復利用會導致吸附性變差,漂浮增多;一個T25瓶建議使用最多不超過3次,其次需要注意無菌操作,避免污染。

問:運輸細胞用的培養(yǎng)基可以回收使用嗎?

答:不能回收使用的,運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)營養(yǎng)在路上已經(jīng)消耗得差不多,所以收到細胞之后,培養(yǎng)箱靜置4-6h之后,請及時按照說明書細胞培養(yǎng)條件更換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)。

問:凍存的細胞出現(xiàn)顏色不一致,有的紅有的粉,對復蘇會有影響嗎?

答:這種情況容易在不同凍存批次間出現(xiàn),與凍存細胞的密度、凍存液配方、溫度導致pH變化等有關,偶爾有遇到這種情況,不是絕對性對細胞狀態(tài)有影響,可以復蘇看下。

問:不同引種單位的同一株細胞,RRID都是一樣的嗎?

答:是的,同一個細胞系只有一個RRID。

科研細胞售后服務

細胞重發(fā)標準

1.細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,重發(fā);

2.收到細胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā);

3.收到細胞3天內,發(fā)現(xiàn)污染問題,經(jīng)核實后,重發(fā);

4.常溫發(fā)貨的細胞靜置4小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇2天后,出現(xiàn)污染,經(jīng)核實后,重發(fā);

5.細胞活性問題,請在收到產品 3 天內給我們提出真實的實驗結果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,經(jīng)核實后,重發(fā);

6.視具體情況而定。

細胞不予重發(fā)標準

1.客戶操作造成細胞污染,不重發(fā);

2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);

3.非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);

4.細胞狀態(tài)不好,未提供真實清晰的培養(yǎng)前3天的細胞狀態(tài)照片,不重發(fā);

5.細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導致細胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā);

6.收到細胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發(fā);

7.視具體情況而定。

MDA-MB-231/Docetaxel人乳腺癌多西紫杉醇耐藥株培養(yǎng)方法條件

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