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細(xì)胞株購(gòu)買:18046200267 廈門愛恪信生物細(xì)胞株引進(jìn)ATCC,DSMZ,JCRB,ECACC,CCTCC,昆明細(xì)胞庫(kù)等保藏中心,正規(guī)來源,細(xì)胞準(zhǔn)確

SK-OV-3/DDP人卵巢癌細(xì)胞順鉑耐藥株

貨號(hào):IMD-017

規(guī)格:1x106cells/T25或1mL凍存管 形態(tài):貼壁生長(zhǎng),上皮細(xì)胞樣

培養(yǎng)基:90% McCoy’s 5A+10% FBS+PS +0.5ug/ml DDP

培養(yǎng)環(huán)境:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

傳代比例:1:2至1:3,每周 2-3次

價(jià)格:¥3000

配套相關(guān)培養(yǎng)產(chǎn)品

  一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱SK-OV-3/DDP人卵巢癌細(xì)胞順鉑耐藥株
細(xì)胞別稱SK-OV-3/DDP;人卵巢癌細(xì)胞順鉑耐藥株
種屬來源
組織來源卵巢
生長(zhǎng)特性貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣
特別說明

收貨后先用不含藥物培養(yǎng)基培養(yǎng)一周到兩周,再用含藥培養(yǎng)基培養(yǎng)。

待細(xì)胞長(zhǎng)到70-80%匯合度時(shí),去掉培養(yǎng)液,加入含0.25ug/ml DDP藥物培養(yǎng),會(huì)有部分細(xì)胞飄起屬于正常現(xiàn)象,待細(xì)胞長(zhǎng)滿即可傳代;一至兩代后可將藥物濃度提高到0.5ug/ml。凍存時(shí)勿加入藥物。

是否導(dǎo)耐藥基因
細(xì)胞代數(shù)10代以內(nèi)
細(xì)胞規(guī)格1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測(cè)
培養(yǎng)基90% McCoy’s 5A+10% FBS+PS +0.5ug/ml DDP
培養(yǎng)條件氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件無血清凍存液,液氮儲(chǔ)存
保藏機(jī)構(gòu)ATCC; HTB-144 BCRC; 60491 DSMZ; ACC-462
細(xì)胞貨期2周左右
運(yùn)輸方式復(fù)蘇發(fā)貨(T25瓶免運(yùn)輸費(fèi)用)/凍存發(fā)貨(需加干冰運(yùn)輸費(fèi)用) 順豐快遞
供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
特別說明以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主
  二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
到貨方式復(fù)蘇細(xì)胞/T25瓶運(yùn)輸
收貨處理1.收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,是否有破損、漏液、渾濁等現(xiàn)象。如果有,請(qǐng)立即和我們聯(lián)系;如果沒有,請(qǐng)您用75%酒精消毒細(xì)胞瓶外壁,再將其置于37度培養(yǎng)箱靜置4h。
2.靜置后觀察細(xì)胞狀態(tài),在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)時(shí),最好在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度??醇?xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X和20X物鏡下,同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為細(xì)胞需要售后時(shí)提供收到細(xì)胞時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。拍照反饋給我們。
傳代密度細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)
傳代方法1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞,棄去消化液,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8 mL/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心4 min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
到貨方式凍存細(xì)胞/1ml凍存管運(yùn)輸
收貨處理1.干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞到貨,請(qǐng)檢查干冰是否完全揮發(fā),細(xì)胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2.為保證細(xì)胞的高存活率,收到產(chǎn)品后,請(qǐng)立即解凍復(fù)蘇細(xì)胞,如若不能復(fù)蘇請(qǐng)立即轉(zhuǎn)入液氮凍存。
培養(yǎng)皿/瓶一管細(xì)胞建議接種到6cm培養(yǎng)皿或者T25瓶
復(fù)蘇操作1.將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。
2.在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。
3.然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中,加入約4 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。
4.第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
注意事項(xiàng)1.運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。
2.因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
3. 凍存細(xì)胞發(fā)貨2管,客戶先復(fù)蘇一支,若復(fù)蘇失敗及時(shí)聯(lián)系我方并在我方指導(dǎo)下復(fù)蘇第二支。
4. 申請(qǐng)售后時(shí)請(qǐng)?zhí)峁┘?xì)胞收貨時(shí)及反饋售后當(dāng)天細(xì)胞清晰照片及培養(yǎng)信息,建議客戶在細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
6. 細(xì)胞在不同實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)由于所使用培養(yǎng)基及血清品牌、個(gè)人操作習(xí)慣、培養(yǎng)瓶品牌等諸多培養(yǎng)條件不盡相同,導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)形態(tài)、生長(zhǎng)速度、貼壁情況均可能有所差異,對(duì)于此類細(xì)胞適應(yīng)環(huán)境生長(zhǎng)的行為,不予過度解釋或免費(fèi)售后。
  三、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方無血清凍存液,液氮儲(chǔ)存
凍存密度如果是有要求每管要凍多少細(xì)胞,那就用1ml完培重懸后,取部分按平時(shí)方法計(jì)數(shù),剩下的細(xì)胞按計(jì)數(shù)需要的細(xì)胞量?jī)龃婕纯伞?
如果沒要求,那就按平時(shí),一個(gè)皿凍一管。
凍存方法待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例
1.收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,加1 mL血清重懸細(xì)胞,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
2.根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5x106~1x107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
3.將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
注意事項(xiàng)凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案

科研細(xì)胞購(gòu)買常見問題

問:為什么官網(wǎng)的培養(yǎng)條件和我看的文獻(xiàn)里細(xì)胞培養(yǎng)條件不一樣呢?

答:部分細(xì)胞是會(huì)出現(xiàn)多種培養(yǎng)條件,我們公司優(yōu)先選擇引種來源的培養(yǎng)條件以及建系者所用培養(yǎng)條件,出現(xiàn)差異的原因是不同實(shí)驗(yàn)室在保藏過程中更改了細(xì)胞的培養(yǎng)條件,為了避免細(xì)胞突然更換培養(yǎng)條件后不適應(yīng),建議老師使用廠家推薦的培養(yǎng)條件培養(yǎng)。

問:凍存細(xì)胞運(yùn)輸與常溫細(xì)胞運(yùn)輸相比有什么區(qū)別?

答:細(xì)胞株發(fā)貨有常溫或者凍存兩種形式,常溫細(xì)胞貨期一般一周左右,復(fù)蘇活細(xì)胞一個(gè)T25瓶發(fā)貨;凍存細(xì)胞有庫(kù)存的話,一般當(dāng)天或者隔天可以發(fā)貨,細(xì)胞系凍存細(xì)胞擔(dān)心客戶復(fù)蘇不成功所以贈(zèng)送了一管,實(shí)際發(fā)貨2管;原代凍存細(xì)胞發(fā)貨1管,凍存細(xì)胞發(fā)貨是10公斤干冰及順豐運(yùn)輸,所以凍存細(xì)胞需額外支付干冰及運(yùn)輸費(fèi)200元。

問:培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)瓶可以重復(fù)利用嗎?

答:一般不建議重復(fù)利用,特別是貼壁不牢固細(xì)胞,重復(fù)利用會(huì)導(dǎo)致吸附性變差,漂浮增多;一個(gè)T25瓶建議使用最多不超過3次,其次需要注意無菌操作,避免污染。

問:運(yùn)輸細(xì)胞用的培養(yǎng)基可以回收使用嗎?

答:不能回收使用的,運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)營(yíng)養(yǎng)在路上已經(jīng)消耗得差不多,所以收到細(xì)胞之后,培養(yǎng)箱靜置4-6h之后,請(qǐng)及時(shí)按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件更換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)。

問:凍存的細(xì)胞出現(xiàn)顏色不一致,有的紅有的粉,對(duì)復(fù)蘇會(huì)有影響嗎?

答:這種情況容易在不同凍存批次間出現(xiàn),與凍存細(xì)胞的密度、凍存液配方、溫度導(dǎo)致pH變化等有關(guān),偶爾有遇到這種情況,不是絕對(duì)性對(duì)細(xì)胞狀態(tài)有影響,可以復(fù)蘇看下。

問:不同引種單位的同一株細(xì)胞,RRID都是一樣的嗎?

答:是的,同一個(gè)細(xì)胞系只有一個(gè)RRID。

科研細(xì)胞售后服務(wù)

細(xì)胞重發(fā)標(biāo)準(zhǔn)

1.細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā);

2.收到細(xì)胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā);

3.收到細(xì)胞3天內(nèi),發(fā)現(xiàn)污染問題,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā);

4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時(shí)并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇2天后,出現(xiàn)污染,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā);

5.細(xì)胞活性問題,請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā);

6.視具體情況而定。

細(xì)胞不予重發(fā)標(biāo)準(zhǔn)

1.客戶操作造成細(xì)胞污染,不重發(fā);

2.客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);

3.非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);

4.細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供真實(shí)清晰的培養(yǎng)前3天的細(xì)胞狀態(tài)照片,不重發(fā);

5.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā);

6.收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時(shí)間證明大于3天的,不重發(fā);

7.視具體情況而定。

SK-OV-3/DDP(人卵巢癌細(xì)胞順鉑耐藥株)培養(yǎng)方法條件

SK-OV-3/DDP(人卵巢癌細(xì)胞順鉑耐藥株)培養(yǎng)視頻教程

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