HPAC細(xì)胞形態(tài),培養(yǎng)基,復(fù)蘇傳代凍存操作步驟介紹
HPAC細(xì)胞形態(tài),培養(yǎng)基,復(fù)蘇傳代凍存操作步驟介紹:本文主要介紹HPAC人胰腺癌細(xì)胞形態(tài)特征貼壁生長,上皮細(xì)胞樣,HPAC細(xì)胞培養(yǎng)操作步驟及需要用到培養(yǎng)體系,讓科研老師輕松掌握HPAC細(xì)胞培養(yǎng)技巧
貨號:IML-172
規(guī)格:1×106cells/T25或1mL凍存管
形態(tài):上皮細(xì)胞樣,貼壁生長
培養(yǎng)基:DMEM/F12+5%FBS+0.002 mg/ml 胰島素+ 0.005 mg/ml 轉(zhuǎn)鐵蛋白+40 ng/ml 氫化可地松+10 ng/ml 表皮生長因子
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
產(chǎn)品貨期:現(xiàn)貨,1周左右發(fā)貨(復(fù)蘇包郵),凍存當(dāng)天或隔天發(fā)貨(收干冰加運(yùn)輸費(fèi)200元)
價格:¥5000
產(chǎn)品規(guī)格:100mL
¥500
產(chǎn)品規(guī)格:100mL
¥98
產(chǎn)品規(guī)格:100mL
¥68
問:為什么官網(wǎng)的培養(yǎng)條件和我看的文獻(xiàn)里細(xì)胞培養(yǎng)條件不一樣呢?
答:部分細(xì)胞是會出現(xiàn)多種培養(yǎng)條件,我們公司優(yōu)先選擇引種來源的培養(yǎng)條件以及建系者所用培養(yǎng)條件,出現(xiàn)差異的原因是不同實驗室在保藏過程中更改了細(xì)胞的培養(yǎng)條件,為了避免細(xì)胞突然更換培養(yǎng)條件后不適應(yīng),建議老師使用廠家推薦的培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
問:凍存細(xì)胞運(yùn)輸與常溫細(xì)胞運(yùn)輸相比有什么區(qū)別?
答:細(xì)胞株發(fā)貨有常溫或者凍存兩種形式,常溫細(xì)胞貨期一般一周左右,復(fù)蘇活細(xì)胞一個T25瓶發(fā)貨;凍存細(xì)胞有庫存的話,一般當(dāng)天或者隔天可以發(fā)貨,細(xì)胞系凍存細(xì)胞擔(dān)心客戶復(fù)蘇不成功所以贈送了一管,實際發(fā)貨2管;原代凍存細(xì)胞發(fā)貨1管,凍存細(xì)胞發(fā)貨是10公斤干冰及順豐運(yùn)輸,所以凍存細(xì)胞需額外支付干冰及運(yùn)輸費(fèi)200元。
問:培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)瓶可以重復(fù)利用嗎?
答:一般不建議重復(fù)利用,特別是貼壁不牢固細(xì)胞,重復(fù)利用會導(dǎo)致吸附性變差,漂浮增多;一個T25瓶建議使用最多不超過3次,其次需要注意無菌操作,避免污染。
問:運(yùn)輸細(xì)胞用的培養(yǎng)基可以回收使用嗎?
答:不能回收使用的,運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)營養(yǎng)在路上已經(jīng)消耗得差不多,所以收到細(xì)胞之后,培養(yǎng)箱靜置4-6h之后,請及時按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件更換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)。
問:凍存的細(xì)胞出現(xiàn)顏色不一致,有的紅有的粉,對復(fù)蘇會有影響嗎?
答:這種情況容易在不同凍存批次間出現(xiàn),與凍存細(xì)胞的密度、凍存液配方、溫度導(dǎo)致pH變化等有關(guān),偶爾有遇到這種情況,不是絕對性對細(xì)胞狀態(tài)有影響,可以復(fù)蘇看下。
問:不同引種單位的同一株細(xì)胞,RRID都是一樣的嗎?
答:是的,同一個細(xì)胞系只有一個RRID。
細(xì)胞重發(fā)標(biāo)準(zhǔn)
1.細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā);
2.收到細(xì)胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā);
3.收到細(xì)胞3天內(nèi),發(fā)現(xiàn)污染問題,經(jīng)核實后,重發(fā);
4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇2天后,出現(xiàn)污染,經(jīng)核實后,重發(fā);
5.細(xì)胞活性問題,請在收到產(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果,用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,經(jīng)核實后,重發(fā);
6.視具體情況而定。
細(xì)胞不予重發(fā)標(biāo)準(zhǔn)
1.客戶操作造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
2.客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
3.非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
4.細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供真實清晰的培養(yǎng)前3天的細(xì)胞狀態(tài)照片,不重發(fā);
5.細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā);
6.收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發(fā);
7.視具體情況而定。
常見細(xì)胞污染類型如何辨別及預(yù)防解決方法:細(xì)胞培養(yǎng)中常見的生物污染類型有7種,分別是細(xì)菌污染,支原體污染,原蟲污染,黑膠蟲污染,真菌污染,病毒污染以及非細(xì)胞污染,真菌污染來源,一般是來自實驗服,并且具有氣候性,多雨,氣候濕潤的季節(jié)容易出現(xiàn);真菌污染屬于微生···
細(xì)胞聚團(tuán)的原因分析及如何避免:培養(yǎng)物中細(xì)胞可能聚集的一些原因包括:1.過度消化、2.環(huán)境壓力、3.組織分解、4.過度生長、5.污染等;如何避免聚團(tuán)細(xì)胞的生成;首先確認(rèn)當(dāng)前細(xì)胞生長密度及狀態(tài),80%左右的生長密度即可進(jìn)行傳代,此時細(xì)胞狀態(tài)較好,且用于傳代的數(shù)量也···
細(xì)胞有空泡原因分析及解決方法:出現(xiàn)細(xì)胞空泡情況有1.細(xì)胞老化2.培養(yǎng)液錯誤配制;3.細(xì)胞消化時操作不當(dāng);4.污染等等,如細(xì)胞老化,解決方法,原代細(xì)胞使用較低代次進(jìn)行實驗,傳代細(xì)胞避免傳代次數(shù)過高
細(xì)胞半換液和全換液操作步驟:第一種方式:細(xì)胞全換液;如果是貼壁細(xì)胞,可以用全量換液法,直接吸去全部舊培養(yǎng)基,補(bǔ)充足量新鮮完全培養(yǎng)基;第二種方式:細(xì)胞半換液;"細(xì)胞半換液"又稱"細(xì)胞半量換液",即棄掉一半舊的培養(yǎng)基,再加一半新的進(jìn)去,選它的原因其實與前面不加···
產(chǎn)品規(guī)格:5*10^5
產(chǎn)品規(guī)格:5*10^5
產(chǎn)品規(guī)格:5*10^5
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產(chǎn)品規(guī)格:1*10^6
產(chǎn)品規(guī)格:1*10^6