INS-1大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞（種屬鑒定報告）

貨號：IM-R026 來源：中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細(xì)胞資源中心

規(guī)格：1×10⁶cells/T25或1mL凍存管

形態(tài)：不規(guī)則，多角，貼壁生長

培養(yǎng)基：RPMI-1640+10%FBS+PS

傳代比例：1：2至1：3，每周2-3次

產(chǎn)品貨期：現(xiàn)貨，1周左右發(fā)貨(復(fù)蘇包郵)，凍存當(dāng)天或隔天發(fā)貨(收干冰加運輸費200元)

大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞INS-1細(xì)胞說明書

價格：￥1500

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配套相關(guān)培養(yǎng)產(chǎn)品

背景介紹培養(yǎng)操作凍存步驟售后服務(wù)

背景簡介

INS-1細(xì)胞源自X射線照射的移植胰島瘤的大鼠，胰島素陽性，可合成胰島素原I和II，可用于beta細(xì)胞功能研究。

一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱	INS-1大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞（種屬鑒定報告）
細(xì)胞別稱	INS-1；大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞
種屬來源	大鼠
組織來源	胰島細(xì)胞
生長特性	貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)	不規(guī)則，多角
疾病特征	胰島細(xì)胞瘤
細(xì)胞代數(shù)	10代以內(nèi)
使用權(quán)限	A類
細(xì)胞規(guī)格	1×10⁶cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測	無
保藏機構(gòu)	AddexBio; CLS; KCB
培養(yǎng)基	RPMI-1640+10%FBS+PS
培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件	無血清凍存液，液氮儲存
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
到貨方式	復(fù)蘇細(xì)胞/T25瓶運輸
收貨處理	1.收到細(xì)胞后，請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況，是否有破損、漏液、渾濁等現(xiàn)象。如果有，請立即和我們聯(lián)系；如果沒有，請您用75%酒精消毒細(xì)胞瓶外壁，再將其置于37度培養(yǎng)箱靜置4h。 2.靜置后觀察細(xì)胞狀態(tài)，在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)時，最好在低倍鏡（4或5X物鏡）下進行，能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度?？醇?xì)胞的形態(tài)請在10X和20X物鏡下，同時給剛收到的細(xì)胞拍照，（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為細(xì)胞需要售后時提供收到細(xì)胞時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。拍照反饋給我們。
傳代密度	細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)
傳代方法	1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。 2.加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細(xì)胞，棄去消化液，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。 3.按6-8 mL/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心4 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。 4.將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
到貨方式	凍存細(xì)胞/1ml凍存管運輸
收貨處理	1.干冰運輸?shù)募?xì)胞到貨，請檢查干冰是否完全揮發(fā)，細(xì)胞是否解凍，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。 2.為保證細(xì)胞的高存活率，收到產(chǎn)品后，請立即解凍復(fù)蘇細(xì)胞，如若不能復(fù)蘇請立即轉(zhuǎn)入液氮凍存。
培養(yǎng)皿/瓶	一管細(xì)胞建議接種到6cm培養(yǎng)皿或者T25瓶
復(fù)蘇操作	1.將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。 2.在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。 3.然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。 4.第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
注意事項	1.運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 2.因運輸問題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。請及時和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。 3. 凍存細(xì)胞發(fā)貨2管，客戶先復(fù)蘇一支，若復(fù)蘇失敗及時聯(lián)系我方并在我方指導(dǎo)下復(fù)蘇第二支。 4. 申請售后時請?zhí)峁┘?xì)胞收貨時及反饋售后當(dāng)天細(xì)胞清晰照片及培養(yǎng)信息，建議客戶在細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。 5.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。 6. 細(xì)胞在不同實驗室培養(yǎng)由于所使用培養(yǎng)基及血清品牌、個人操作習(xí)慣、培養(yǎng)瓶品牌等諸多培養(yǎng)條件不盡相同，導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)形態(tài)、生長速度、貼壁情況均可能有所差異，對于此類細(xì)胞適應(yīng)環(huán)境生長的行為，不予過度解釋或免費售后。
三、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方	無血清凍存液，液氮儲存
凍存密度	如果是有要求每管要凍多少細(xì)胞，那就用1ml完培重懸后，取部分按平時方法計數(shù)，剩下的細(xì)胞按計數(shù)需要的細(xì)胞量凍存即可。如果沒要求，那就按平時，一個皿凍一管。
凍存方法	待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例 1.收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，加1 mL血清重懸細(xì)胞，進行細(xì)胞計數(shù)。 2.根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5x10⁶~1x10⁷/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。 3.將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
注意事項	凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性，若有異常，及時調(diào)整實驗方案

INS-1大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞文獻溯源

1986年始，迄今為止，關(guān)于大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞(INS-1)的文獻已有1744篇。

INS-1大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞文獻溯源圖1

INS-1大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞文獻溯源圖2

在pubmed數(shù)據(jù)庫中用“INS-1 cell line”搜索該關(guān)鍵詞，第一篇為1986年S Jard在J Cardiovasc Pharmacol.發(fā)表的“WRK1 cells: a model system for studying properties of V1a vasopressin receptors”。

INS-1大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞應(yīng)用領(lǐng)域

INS-1細(xì)胞是一種常用的胰島素分泌細(xì)胞系，在研究胰島素分泌調(diào)節(jié)方面具有重要應(yīng)用價值。INS-1細(xì)胞主要含有胰島素、少量胰高血糖素和生長抑素，并保留了葡萄糖誘導(dǎo)的胰島素分泌的正常調(diào)節(jié)。雖然INS-1細(xì)胞系的行為不能完全模擬原代β細(xì)胞的生理活動，但在研究β細(xì)胞功能和功能障礙的分子事件方面是非常有價值的工具。

INS-1細(xì)胞可以建立小鼠內(nèi)分泌研究模型，模擬某些糖尿病的生理狀態(tài)，研究胰島素抗性、胰島功能調(diào)控以及胰島細(xì)胞存活的機制，有助于深入了解糖尿病的發(fā)生機制和藥物治療的效果。

INS-1細(xì)胞被用于研究受污染物影響β細(xì)胞功能的篩選系統(tǒng)，展示其在β細(xì)胞研究中的應(yīng)用潛力。

INS-1細(xì)胞表現(xiàn)出對葡萄糖做出較強的胰島素反應(yīng)，是研究胰島素分泌機制和調(diào)節(jié)的重要細(xì)胞模型。

INS-1細(xì)胞被用來研究炎癥因子和細(xì)胞因子對胰島素分泌和細(xì)胞存活的影響，為內(nèi)分泌疾病的研究提供重要參考。

INS-1大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞標(biāo)志物

大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞INS-1的標(biāo)志物包括胰島素、胰高血糖素、胰島素原、C肽、GLUT2、GCK，以及細(xì)胞表面抗原CD73、CD105和CD146等。這些標(biāo)志物對研究INS-1細(xì)胞的生物學(xué)特性和功能至關(guān)重要。

科研細(xì)胞購買常見問題

問：為什么官網(wǎng)的培養(yǎng)條件和我看的文獻里細(xì)胞培養(yǎng)條件不一樣呢？

答：部分細(xì)胞是會出現(xiàn)多種培養(yǎng)條件，我們公司優(yōu)先選擇引種來源的培養(yǎng)條件以及建系者所用培養(yǎng)條件，出現(xiàn)差異的原因是不同實驗室在保藏過程中更改了細(xì)胞的培養(yǎng)條件，為了避免細(xì)胞突然更換培養(yǎng)條件后不適應(yīng)，建議老師使用廠家推薦的培養(yǎng)條件培養(yǎng)。

問：凍存細(xì)胞運輸與常溫細(xì)胞運輸相比有什么區(qū)別？

答：細(xì)胞株發(fā)貨有常溫或者凍存兩種形式，常溫細(xì)胞貨期一般一周左右，復(fù)蘇活細(xì)胞一個T25瓶發(fā)貨；凍存細(xì)胞有庫存的話，一般當(dāng)天或者隔天可以發(fā)貨，細(xì)胞系凍存細(xì)胞擔(dān)心客戶復(fù)蘇不成功所以贈送了一管，實際發(fā)貨2管；原代凍存細(xì)胞發(fā)貨1管，凍存細(xì)胞發(fā)貨是10公斤干冰及順豐運輸，所以凍存細(xì)胞需額外支付干冰及運輸費200元。

問：培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)瓶可以重復(fù)利用嗎？

答：一般不建議重復(fù)利用，特別是貼壁不牢固細(xì)胞，重復(fù)利用會導(dǎo)致吸附性變差，漂浮增多;一個T25瓶建議使用最多不超過3次，其次需要注意無菌操作，避免污染。

問：運輸細(xì)胞用的培養(yǎng)基可以回收使用嗎?

答：不能回收使用的，運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)營養(yǎng)在路上已經(jīng)消耗得差不多，所以收到細(xì)胞之后，培養(yǎng)箱靜置4-6h之后，請及時按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件更換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)。

問：凍存的細(xì)胞出現(xiàn)顏色不一致，有的紅有的粉，對復(fù)蘇會有影響嗎？

答：這種情況容易在不同凍存批次間出現(xiàn)，與凍存細(xì)胞的密度、凍存液配方、溫度導(dǎo)致pH變化等有關(guān)，偶爾有遇到這種情況，不是絕對性對細(xì)胞狀態(tài)有影響，可以復(fù)蘇看下。

問：不同引種單位的同一株細(xì)胞，RRID都是一樣的嗎？

答：是的，同一個細(xì)胞系只有一個RRID。

科研細(xì)胞售后服務(wù)

細(xì)胞重發(fā)標(biāo)準(zhǔn)

1.細(xì)胞運輸途中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等，重發(fā)；

2.收到細(xì)胞未開封，如出現(xiàn)污染狀況，重發(fā)；

3.收到細(xì)胞3天內(nèi)，發(fā)現(xiàn)污染問題，經(jīng)核實后，重發(fā)；

4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇2天后，出現(xiàn)污染，經(jīng)核實后，重發(fā)；

5.細(xì)胞活性問題，請在收到產(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果，用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，經(jīng)核實后，重發(fā)；

6.視具體情況而定。

細(xì)胞不予重發(fā)標(biāo)準(zhǔn)

1.客戶操作造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；

2.客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；

3.非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；

4.細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供真實清晰的培養(yǎng)前3天的細(xì)胞狀態(tài)照片，不重發(fā)；

5.細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的，不重發(fā)；

6.收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的，不重發(fā)；

7.視具體情況而定。

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