上皮細(xì)胞是指位于皮膚或腔道表層的細(xì)胞，它的形狀有扁平狀，柱狀等等，皮膚外層的上皮細(xì)胞普遍的角質(zhì)化，有保護(hù)和吸收的作用，腔道中的上皮細(xì)胞多分化，有分泌、排泄和吸收等功能。

上皮細(xì)胞是什么

上皮細(xì)胞是位于皮膚或腔道表層的細(xì)胞。上皮細(xì)胞根據(jù)器官的不同而有所不同：尿常規(guī)的上皮細(xì)胞，是衰亡、脫落的皮細(xì)胞，沒有很特定的指向意義。非SLE的人，包括正常人，有了什么相關(guān)的炎癥，脫落下去，給尿常規(guī)檢到了，也是有的。

上皮細(xì)胞分類

上皮組織分為被覆上皮、腺上皮、感覺上皮、生殖上皮、肌上皮等，而通常所說的上皮就是指被覆上皮。

上皮細(xì)胞按細(xì)胞層數(shù)可分為單層和復(fù)層兩類，按形狀可分為柱狀和鱗狀。

柱狀上皮細(xì)胞：主要分布于鼻腔、鼻咽、器官、肺、胃、腸、子宮頸、子宮內(nèi)膜及輸卵管等部位。

柱狀上皮細(xì)胞

鱗狀上皮細(xì)胞：被覆于全身皮膚、口腔、喉部、鼻咽的一部分、食道、陰道的全部以及子宮頸。鱗狀上皮細(xì)胞分為基底層細(xì)胞、中層細(xì)胞和表層細(xì)胞。

鱗狀上皮細(xì)胞

上皮細(xì)胞作用

皮膚外層的上皮細(xì)胞普遍角質(zhì)化，有保護(hù)和吸收的作用。

腔道中的上皮細(xì)胞多分化，有分泌，排瀉和吸收等功能。

消化器官和肺等器官表面的上皮細(xì)胞，對于消化吸收、交換氧等發(fā)揮著重要作用 [1] 。

上皮細(xì)胞特點(diǎn)

上皮組織的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是細(xì)胞結(jié)合緊密，細(xì)胞間質(zhì)少。通常具有保護(hù)、吸收、分泌、排泄的功能。

1.細(xì)胞間緊密結(jié)合，細(xì)胞外有一層細(xì)胞衣細(xì)胞衣就是組成細(xì)胞膜的糖蛋白外露的糖鏈，具有較強(qiáng)的粘著作用，細(xì)胞間隙中的鈣離子，和細(xì)胞間特殊的細(xì)胞間連接對細(xì)胞的粘合也有重要作用。

2.明顯的極性，細(xì)胞的兩端在結(jié)構(gòu)上和功能上有差別，一端表面朝向體表或體內(nèi)管、腔、囊的腔面，叫游離面;與游離而相對的另一端，叫基底面。分布在不同部位的上皮組織的細(xì)胞游離面，常有不同的特化結(jié)構(gòu)與其特定的功能相適應(yīng)。如腸上皮有密集的微絨毛擴(kuò)大了吸收面;呼吸道上皮有能擺動的纖毛，可以排出侵入的灰塵等異物?；酌嬉话憬枰粚踊づc其深層的結(jié)締組織相連。有些上皮細(xì)胞的基底面，還具有擴(kuò)大細(xì)胞基底表面積的胞膜內(nèi)褶或加強(qiáng)與基膜連接的結(jié)構(gòu)。

3.一般沒有血管，其營養(yǎng)由深層結(jié)締組織中的毛細(xì)血管透過基膜供應(yīng)?；ぴ谘号c上皮組織的物質(zhì)交換中起著有選擇性的分子篩作用。

4.上皮組織內(nèi)神經(jīng)末梢的分布較豐富，因此感覺較靈敏。例如，皮膚的表皮和支氣管上皮就如此。

上皮細(xì)胞培養(yǎng)

1)表皮細(xì)胞培養(yǎng)

1.取材：取外科植皮或手術(shù)殘余皮膚小塊，以角化層薄者為佳，早產(chǎn)流產(chǎn)兒皮膚更好，切成0.5～1平方厘米小塊。

2.EDTA處理：先置入0.02%EDTA中室溫置5分鐘。

3.冷消化：換入0.25%胰蛋白酶中，置4℃過夜。

4.分離：取出皮膚，用血管鉗或鑷子把表皮與真皮層分開。

5.溫消化：取出表皮單獨(dú)處理，用剪刀剪成更小的塊后，置入新的0.25%胰蛋白酶中，37℃再消化30～60分鐘。

6.用吸管輕輕反復(fù)吹打，使成細(xì)胞懸液。

7.培養(yǎng)液：通過80目不銹鋼紗網(wǎng)濾過后，低速離心，吸上清，直接加入Eagle液和20%小牛血清，制成細(xì)胞懸液，接種入碟皿中，CO2溫箱培養(yǎng)。

2)乳腺組織培養(yǎng)

直接培養(yǎng)法：(適于培養(yǎng)含纖維少的軟組織)。

1.在含有少量培養(yǎng)液或Hanks液的容器中，用鋒利刀片將組織反復(fù)切割成碎塊。

2.把組織碎塊連同液體注入離心管中，再補(bǔ)加少許培養(yǎng)液，用吸管吹打片刻，置試管架3～5分鐘。吸除上層液可排除非乳腺細(xì)胞部分。重復(fù)2～3次。

3.末次處理結(jié)束后，向沉降管中再補(bǔ)加培養(yǎng)液，用吸管稍吹打，使沉降物重懸。不待細(xì)胞團(tuán)塊下降立即通過3～4層無菌紗布濾入另管中。

4.調(diào)整好適宜密度，接種入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。

膠原酶消化法：(適于處理含纖維多的較硬組織)

其過程與培養(yǎng)其它組織相同。

3)胃上皮細(xì)胞培養(yǎng)

1.取材：取胃潰瘍或胃癌手術(shù)切除胃標(biāo)本遠(yuǎn)端非病變區(qū)粘膜少許。

2.清洗：用含慶大霉素(400微克/毫升)和二性霉素(2微克/毫升的Hanks)液漂洗后，用鈍器剝離下粘膜，剪成1mm3大小。

3.消化：在I型膠原酶和透明質(zhì)酸酶中，于37℃中消化80分鐘。

4.離心：收集細(xì)胞懸液，800轉(zhuǎn)/分離心后，Hanks液漂洗兩次。

5.接種：末次離心后加入含有1%～2%胎牛血清的完全培養(yǎng)基，接種入不同孔數(shù)的培養(yǎng)板中，接種量依不同實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩ā?/p>

4)肝細(xì)胞培養(yǎng)

初代組織塊培養(yǎng)：取新鮮肝臟，先剝除被膜和血管等纖維成分，用刀或剪刀把肝臟剪成1mm3左右的小塊，采用帖壁培養(yǎng)法。

5)內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)

1.取產(chǎn)后的新鮮臍帶。如不立即培養(yǎng)可以保存于4℃中，但不宜超過12小時(shí)。無菌剪取長10～15厘米一段。其它如胚胎和幼體動物的大血管，亦可用于培養(yǎng)。

2.先用三通注射器吸溫PBS液注入臍帶的靜脈中，洗除殘血，注入口處宜用線繩結(jié)扎，以防液體返流。

3.用血管鉗夾緊臍帶一端，從另端向臍靜脈中徐徐注入最終濃度為0.1%的膠原酶，待末端出現(xiàn)液體后結(jié)扎之，令充滿血管，注入口亦應(yīng)結(jié)扎，以防液體返流，消化3～10分鐘。

4.吸出含有內(nèi)皮細(xì)胞的消化液，注入離心管中，為獲取更多細(xì)胞，可再注入溫PBS沖洗2～3次徹底清除干凈殘余細(xì)胞，一并注入離心管中離心。

5.吸除上清，加1640培養(yǎng)液，制成細(xì)胞懸液，接種入瓶皿中培養(yǎng)，順利時(shí)2～3天內(nèi)細(xì)胞即可長成單層。

6)毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)

腫瘤條件培養(yǎng)基制備：

1.取C3H小鼠的S-180實(shí)體肉瘤組織。

2.胰蛋白酶消化，Dulbecco改良Eagle氏培養(yǎng)液15ml(含10%小牛血清)，接種到T-75 Falcon產(chǎn)培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。

3.在細(xì)胞生長接近完全匯合時(shí)，收集培養(yǎng)液制成條件培養(yǎng)基;再用含10%小牛血清的新培養(yǎng)液后，也每隔兩天收集一次，可獲得多量條件培養(yǎng)。

4.4000轉(zhuǎn)/分離心后，再通過0.22μm微孔濾膜濾過，-20℃凍存?zhèn)溆?臨用前融解)。

參考資料

1.內(nèi)臟上皮細(xì)胞癌變與一種蛋白質(zhì)有關(guān) .新華網(wǎng).2015-03-21[引用日期2018-10-08]