產(chǎn)品簡(jiǎn)介

胰蛋白酶(Trypsin)簡(jiǎn)稱胰酶，是一種絲氨酸水解酶，能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基端切斷。在組織細(xì)胞的提取、培養(yǎng)，以及體外細(xì)胞培養(yǎng)過程中，均會(huì)使用到胰蛋白酶消化液，用于水解細(xì)胞間蛋白質(zhì)，使組織或細(xì)胞離散成單個(gè)細(xì)胞。胰酶在 37℃ pH 8.0 條件下消化能力最強(qiáng)。常用胰酶工作濃度為 0.25%。EDTA 可以螯合鈣鎂離子，胰酶溶液中搭配 EDTA 使用可以加速細(xì)胞間連接蛋白的水解，起到增強(qiáng)消化的效果。

產(chǎn)品信息

0.25%胰蛋白酶消化液 (溶于 PBS，含 EDTA，含酚紅)使用說明

貼壁細(xì)胞

1.從冰箱中取出本產(chǎn)品后在常溫下放置，每隔20分鐘輕微晃動(dòng)以促進(jìn)均勻解凍，至充分解凍后可立即使用。解凍后的產(chǎn)品在 4℃保存不可超過一個(gè)月。

2.吸去細(xì)胞培養(yǎng)液，用無菌的PBS、D-Hank’s液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞去除殘余的血清。

3.加入適量本產(chǎn)品覆蓋細(xì)胞，室溫靜置消化1-5 min。

4.顯微鏡下觀察，當(dāng)細(xì)胞出現(xiàn)明顯收縮(用移液槍輕輕吹打細(xì)胞較容易將細(xì)胞吹打下來)，吸除胰酶細(xì)胞消化液，加入含血清的細(xì)胞培養(yǎng)液，輕輕吹打細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液，即可直接傳代培養(yǎng)。如果用移液槍輕輕吹打時(shí)很難使細(xì)胞從板底脫落，表明消化時(shí)間不夠，可加入胰酶細(xì)胞消化液重新消化。注意避免過度消化。

0.25%胰蛋白酶消化液 (溶于 PBS，含 EDTA，含酚紅)注意事項(xiàng)

1.由于組織或細(xì)胞性質(zhì)不同，實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)依據(jù)具體情況，確定最佳消化時(shí)間；消化細(xì)胞時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)狀況。

2.本產(chǎn)品不含抑菌劑，在使用過程中要特別注意無菌操作，避免消化液被微生物污染。

3.本產(chǎn)品不宜4℃長(zhǎng)期保存，避免反復(fù)凍融，建議分裝成小份后-20℃保存。

4.對(duì)于胰酶中EDTA、酚紅的選擇，可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要，對(duì)于一般的腫瘤細(xì)胞，選擇含EDTA的胰酶消化液。對(duì)于較敏感、脆弱的細(xì)胞，例如原代細(xì)胞及很容易消化的細(xì)胞，選擇不含EDTA的胰酶消化液，如果細(xì)胞特別敏感，需要選擇胰蛋白酶濃度更低的消化液。如果需要用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡，則選用不含EDTA的胰酶消化液。

5.為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。