產(chǎn)品描述

心肌細(xì)胞凍存液是一種無動物成分、無血清，化學(xué)成分明確的細(xì)胞凍存液，可在穩(wěn)定細(xì)胞表型和生長狀態(tài)，提供最佳的細(xì)胞回收效率。凍存細(xì)胞可在液氮中長期保存(>5 年)。

產(chǎn)品信息

表1. 試劑盒組成信息

產(chǎn)品特性

1、即用型細(xì)胞凍存液

2、高安全性，病毒、病菌和支原體等污染可能性低

3、細(xì)胞存活率和活力高，批次性差異小

操作步驟

一、細(xì)胞凍存

(1) 常規(guī)方法收集對數(shù)期的細(xì)胞于離心管中。

(2) 根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的密度和凍存管的大小確定所需凍存細(xì)胞數(shù)。

(3) 將所需數(shù)目的細(xì)胞懸浮液置于離心管中，300g，5 分鐘離心收集培養(yǎng)細(xì)胞沉淀，徹底棄去離心管中的上清液。

(4) 加入適量的心肌細(xì)胞凍存液于離心管中，使細(xì)胞濃度約為 1x106-1x107/ml。輕柔地混勻細(xì)胞，制成細(xì)胞混合液。

(5) 將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)記的凍存管中，建議每管 1ml 或 1.5ml。

(6) 將分裝好的細(xì)胞凍存管放入凍存盒中于-80℃凍存1天，第二天轉(zhuǎn)移至液氮中保存。

二、復(fù)蘇步驟

(1) 從液氮中取出凍存的細(xì)胞，立即放入 37℃水浴槽中快速解凍。

(2) 待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后，立即加入 1ml 細(xì)胞培養(yǎng)基(含10μM Y-27632)于冷凍管中與細(xì)胞混合，將其中的混合液移至含有約 5ml 該細(xì)胞培養(yǎng)基(含10μM Y-27632)的離心管中，300g，5 分鐘離心收集凍存細(xì)胞沉淀，移去上清液(操作時小心，切勿將細(xì)胞沉淀移去)。

(3) 加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基(含10μM Y-27632)，使用移液管緩緩加入到細(xì)胞沉淀，輕柔地混勻，將細(xì)胞混合液移至事先基質(zhì)膠包被(1:100稀釋)的培養(yǎng)容器中，24 h后換成不含 Y-27632的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，視培養(yǎng)基顏色或隔1-2天換液。

(4) 鏡檢細(xì)胞后，可根據(jù)各自研究的需要和方法經(jīng)行細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)。

注意事項

(1) 本產(chǎn)品可常溫運輸，2-8℃保存，有效期12月，-20℃保存有效期24月

(2) 凍存細(xì)胞分裝后，應(yīng)盡快移入到-80℃超低溫冰箱，室溫時間不超過5分鐘