產(chǎn)品簡(jiǎn)介

Lentivirus Precipitation Solution(慢病毒濃縮液)是一種簡(jiǎn)單、快速、高效的慢病毒濃縮試劑，能夠?qū)λ蓄愋偷穆《绢w粒進(jìn)行簡(jiǎn)單且有效的富集。該試劑操作簡(jiǎn)便，僅需將慢病毒原液和5×慢病毒濃縮液按比例混合，孵育一定時(shí)間，即可用普通高速離心機(jī)離心富集，得到濃縮的慢病毒顆粒，回收率可達(dá)90%以上，提高100倍病毒滴度。

產(chǎn)品說明

慢病毒濃縮液使用說明

1.收集慢病毒上清液，于4℃，4000 g 離心20min，去除細(xì)胞碎片;

2.上清轉(zhuǎn)移至新的離心管中，于4℃，12000 g 離心30min，去除細(xì)胞中的雜蛋白;(或?qū)⑹占穆《旧锨逡翰捎?0.45 μm濾膜的無菌濾器過濾除去細(xì)胞碎片，如果使用濾膜過濾，只能使用低蛋白結(jié)合力的纖維素醋酸酯或聚醚砜膜，不能用硝酸纖維素膜，在過病毒原液之前，濾膜可用3-5 mL預(yù)冷PBS提前過一次);

3.上清轉(zhuǎn)移至新的離心管中，將慢病毒上清液與5x慢病毒沉淀濃縮液按4:1(病毒上清液4份，病毒濃縮液1份)的比例顛倒混勻，每30min混合一次，共進(jìn)行3-5次，置于4℃孵育過夜(適當(dāng)延長(zhǎng)孵化時(shí)間可以提高病毒回收率)

4.過夜孵育的混合液，于4℃，4000 g 離心，20min。

5.小心去除上清，用原體積1/10~1/100 的 DMEM 或 PBS 重懸慢病毒顆粒(部分情況下，沉淀物不一定肉眼可見)，輕輕吹打均勻，重懸沉淀物后，可以測(cè)定濃縮慢病毒樣品的滴度后根據(jù)實(shí)驗(yàn)使用量分裝并置于-80℃保存(盡量減少慢病毒反復(fù)凍融的次數(shù)，以免降低病毒滴度)。

使用注意事項(xiàng)

1.本試劑盒不提供濾器和注射器，請(qǐng)自備濾器和注射器。

2.本試劑盒成分雖然對(duì)慢病毒反復(fù)凍融有一定的保護(hù)作用，但是請(qǐng)盡量避免慢病毒反復(fù)凍融。

3.操作時(shí)請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服、戴好手套。